荧光检测器以其高灵敏度和强选择性，广泛应用于HPLC、毛细管电泳及微流控分析系统中。然而在实际使用中，可能会因光源衰减、光学污染、参数设置不当或样品特性干扰，出现信号弱、基线漂移、噪声大、峰形异常或无响应等问题，严重影响分析结果的可靠性。掌握荧光检测器典型故障的成因与对策，是保障测得准、跑得稳、用得久的关键。
一、荧光信号弱或无响应
原因：激发/发射波长设置错误、光源老化、流通池污染或样品无荧光特性。
解决方法：
核对目标物的最佳激发（Ex）与发射（Em）波长（可查文献或做扫描）；
更换氙灯或LED光源（氙灯寿命通常1000–2000小时）；
用甲醇或异丙醇冲洗流通池30分钟，清除吸附杂质；
确认样品是否需衍生化（如氨基酸、糖类本身无荧光，需标记FITC等荧光试剂）。
二、基线漂移或噪声增大
原因：流动相含荧光杂质、气泡进入流通池、温度波动或光电倍增管（PMT）高压不稳。
解决方法：
使用HPLC级溶剂，并经0.22μm滤膜过滤、超声脱气；
检查泵是否漏液或进气，确保流路无气泡；
开启柱温箱与检测器恒温功能（建议30–40℃），减少热噪声；
若PMT老化，联系厂商校准或更换。
三、峰拖尾或分叉
原因：流通池死体积过大、连接管路过长或内壁吸附样品。
解决方法：
使用低扩散流通池（如1–8μL体积），缩短连接管线（内径≤0.12mm）；
对碱性或疏水性样品，在流动相中添加0.1%三乙胺或调节pH抑制吸附；
定期用5%硝酸+甲醇混合液清洗流路。
四、记忆效应（前次样品残留）
原因：高浓度样品在流通池或管路中残留。
解决方法：
增加强洗针程序（如90%有机相冲洗1–2分钟）；
使用梯度洗脱，末段提高有机相比例清洗系统；
对强吸附物质（如多环芳烃），可定期用四氢呋喃（THF）冲洗（注意兼容性）。
五、灵敏度突然下降
原因：光学窗口污染、滤光片偏移或光路未对准。
解决方法：
关机后用无绒镜头纸蘸无水乙醇轻拭石英窗（切勿划伤）；
检查激发/发射滤光片是否松动（部分机型需专业校准）；
运行仪器自检程序，验证光路能量值是否在正常范围。
更新时间：2026-01-23 
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